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1、液体香菇菌种怎么制作
液体菌种的制作及使用方法液体菌种的制作及使用方法随着食用菌生产的发展,食用菌制种方法在传统固体制作的基础上在不断的改进和提高,其中液体菌种的制作便是其中之一。 液体发酵技术是现代生物技术之一,起源于美国。它是指在生化反应器中,模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基,灭菌后接入菌种,通入无菌空气并加以搅拌,提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气,并控制适宜的外界条件,进行菌丝大量培养繁殖的过程。工业化大规模的发酵培养即为发酵生产,亦称深层培养或沉没培养。液体菌种由于具有生产规模化、控制自动化、生长无菌化、发菌高速化的生产应用优势,为食用菌产业化的发展提供了良好的种源条件,是食用菌产业化发展的必然方向,已被业内人士所看好。液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。近年来,国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。与固体菌种相比,它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点,因而受到了广大栽培者的欢迎。目前我国已能进行深层发酵的食用菌有:香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等。 一、液体菌种的培养方法 常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。若少量生产,可以用摇瓶培养法。深层培养需要一整套工业发酵设备,如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等,故投资大,只适用于工厂化的大规模生产。而摇瓶培养投资少,设备技术简单,适合一般菌种厂生产使用。本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。
1、食用菌液体发酵的培养基根据培养基中组成的不同,可分为天然培养基和合成培养基。天然培养基的组成均为天然有机物。合成培养基则是采用—些已知化学成分的营养物质作培养基。在生产上,还根据工艺将培养基分为孢子培养基、种子培养基及发酵培养基。但无论如何划分,每一种培养基的组成中都离不开碳、氮、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。
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1、碳、氮比(C/N) 碳、氮比指碳源及氮源在培养基中的含量比。构成菌丝细胞的碳、氮比通常是:8~12:1。由于菌丝生长过程中,一般需50%的碳源作为能量供给菌丝呼吸,另50%的碳源组成菌体细胞。因此培养基中理想碳、氮比的理论值为16~24:1。在液体培养中以菌丝增殖为目的的培养,通常碳、氮比以20:1为宜。 虽然食用真菌的液体培养一般要求较高的碳与氮比,即C:N=20:1左右生长较好,但许多菌种也能在较宽的碳、氮比范围内生长。不同的菌种所要求合适的碳、氮比,可通过实验求得。
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2、无机盐与微量元素 许多无机盐及微量元素对菌种的生理过程的影响与其浓度有关。不同的菌种,对无机盐及微量元素要求的最适浓度也不同。
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2、1.磷 磷是细胞中核酸、核蛋白等重要物质的组成部分,又是许多辅酶(或辅基)高能磷酸键的组成部分。磷是食用菌液体发酵不可缺少的物质,常加入磷酸二氢钾以提供磷,加入量大约为0.1%~0.15%。
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2、2.镁 镁在细胞中起着稳定核蛋白、细胞膜和核酸的作用,而且是—些重要酶的活化剂,是食用真菌液体培养中不可缺少的营养成分。一般通过加入硫酸镁以提供镁,浓度通常是0.05%~0.075%。
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2、3.钾、钙、钠 钾不参与细胞结构物质的构成,但控制原生质的胶态和细脑膜的透性。钙离子与细胞透性有关。钠离子能维持细胞渗透压,钠离子可以部分代替钾离子的作用。三种物质需求量甚微,若采用天然培养基,可不必另加。
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2、4.硫、铁 硫是菌体细胞蛋白质的组成部分(胱氨酸、半胱氨酸及蛋氨酸中皆含硫),铁是细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的组成部分,亦是菌体有氧代谢中不可缺少的元素。
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2、5.锌、锰、钴、铜 锌、锰、钴等离子是某些酶的辅基或激活剂。铜是多元酚氧化酶的活性基。在配制培养基时应注意,镁和磷的添加不宜过多,否则会带来危害。菌体对锌、锰、钴、铜等微量元素的需求量甚少,一般天然有机原料中均有,不必另加。碳酸钙本身不溶于水,但可以调节培养其中的酸碱度。磷酸盐与碳酸钙不宜混合灭菌,否则会形成不溶于水的磷酸盐,使可溶性的磷酸盐浓度大大降低。
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3、维生素 维生素在细胞中作为辅酶的成分,具有催化功能。大多数食用真菌的培养都与B族维生素有关,维生素B1是目前已知对绝大多数食用真菌生长有利的维生素。其适宜浓度在50~1000μg/L之间。
2、摇瓶振荡培养技术 培养液配制好后,装入500mL容量的三角烧瓶中,每瓶装量为100mL,并加入0~15粒小玻璃珠,加棉塞后再包扎牛皮纸封口,在
1、5kg/cm2压力下灭菌30分钟,取出冷却到30℃以下时,接入一块约2平方厘米的斜面菌种,于23℃~25℃下静置培养48小时,再置往复式摇床上振荡培养,振荡频率为80~100次/分,振幅6cm~10cm。如果用旋转式摇床,振荡频率为200~220转/分。摇床室温控制在24℃~25℃,培养时间因菌类不同而异,一般是在7天左右。培养结束的标准是:培养液清澈透明,液中悬浮着大量小菌丝球,并伴有各种菇类特有的香味。 二、液体菌种的检验方法 对液体菌种进行检验可采用感官检查和取样测验相结合的方法。
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1、 感官检查 可采用“看、旋、嗅”的步骤进行检查。 看:将样品静置桌上观察。一看菌液颜色和透明度,正常发酵醪液呈黄色或黄褐色,清澈透明,菌丝颜色因菌种而异,老化后颜色变深;染杂菌的醪液则混浊不透明。二看菌丝形态和大小,正常的菌丝大小一致,呈球状、片状、絮状或棒状,菌丝粗壮,线条分明;而染杂菌后,菌丝纤细,轮廓不清。三看上清液与沉淀的比例,菌丝体占比例越大越好,较好的液体菌种,在瓶中所占比例可达80%左右。四看pH值指标是否变色,在培养液中加入甲基红或复合指标剂,经3~5天颜色改变,说明培养液pH值到达
4、0左右,为发酵点;如果在24小时内即变色,说明因杂菌快速生长而使培养液酸度剧变。五看有无酵母线,如果在培养液与空气交界处的瓶壁上有灰色条状附着物,说明为酵母菌污染所致,此称为酵母线。 旋:手提样品瓶轻轻旋转一下,观其菌丝体的特点。醪液的粘稠度高,说明菌种性能好;稀薄者表明菌球少,不宜使用。菌丝的悬浮力好,放置5分钟不沉淀,表明菌种生长力强;反之,如果菌丝极易沉淀,说明菌丝已老化或死亡。再次观其菌丝状态,大小不一,毛刺明显,表明是供氧不足;如果菌球缩小且光滑,或菌丝纤细并有自溶现象,说明污染了杂菌。 嗅:在旋转样品后,打开瓶盖嗅气味。培养好的优质液体菌种,均具有芳香气味;而染杂菌的培养液则散发出酸、甜、霉、臭等各种异味。
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2、 取样测验 可取液体菌种进行称重检查和粘度检查;生长力测定和出菇试验;化学检查,包括测pH值、糖含量和氧含量等;显微检查,包括细胞分裂状态观察、普通染色和特殊染色等。 三、液体菌种的使用方法 液体菌种可作原种使用,也可作栽培使用。
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1、 作原种 取一支100ml。兽用注射器,去掉针尖,换一根内径1mm~2mm,长100mm~120mm的不锈钢钢管,制成一个菌种接种器。使用前,洗净接种器并用纱布包好,经高压蒸汽灭菌,冷却后抽取液体菌种即可进行接种。 经灭菌待接入菌种的原种瓶,先要在无菌条件下去掉棉塞,并改换无菌薄膜包扎瓶口。接种时,将针管插入瓶口上的薄膜,每瓶接种量为10mL~15ml,要注意使液体菌种均匀分布在培养基表面,拔出针管后要立即用胶布贴封针孔,竖放在培养室的床架上进行培养。
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2、 作栽培种或直接进行栽培 液体菌种在作栽培使用时,瓶栽的每瓶接种量为10mL~15mL;熟料袋栽的每袋接种量为,小袋10mL~15mL,大袋的20mL~30mL;开放式床栽的,每平方米接种量为500mL~1000mL,不需要接种针筒,可直接均匀洒在培养料面,或进行穴播。
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2、跪求,在玉米芯上种植蘑菇的详细步骤及方法!(还有问一下河南省周口市太康县县城哪个地方有卖蘑菇菌种的!)
配方一:玉米芯70%、甘蔗渣15%、麦麸10%、石膏粉2%、石灰粉3% 配方二:玉米芯75%、棉籽壳20%、石膏粉2%、石灰粉3% 注意:玉米芯粉碎时不宜太细,因为料加水后会粘结成团,透气性差,所以因加工成颗粒状为宜。
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3、玉米秸秆种植草菇技术和菌种哪里有?
一、栽培平菇。主要材料:玉米桔秆、棉籽皮、平菇菌种等。方法:将玉米秸秆粉碎为1~2厘米长,与棉籽皮按1∶1的比例混合,加入2%的石灰和1%的磷酸二氢钾,加适量多菌灵或克霉灵,加干料的
1、5倍水后进行搅拌。闷料24小时,进行装袋接种。采用层播发菌,菌种用量为15%。由于玉米秸秆透气性良好,随着纤维素的分解,养分供应充足,所以菌丝生长总体速度较快,超过了纯棉籽皮,同时污染率也比较低。 二、栽培草菇。主要材料:玉米秸秆、棉籽壳、草菇菌种等。方法:将玉米桔秆用粉碎机粉碎成0.5厘米的碎末,按玉米秸秆末50公斤、棉籽壳
14、3公斤、麦麸5公斤、硫酸铵35
7、5克、石灰715克、石膏715克、水150升的比例拌匀后堆积发酵。按常规发酵法管理,发酵完毕后摊开。待料温降至40℃时,趁热装箱或铺阳畦接种。菌种掰成直径2厘米大小的颗粒,穴播,每8~10厘米厚培养料播一层菌种,共播3层,表面盖上1厘米左右的培养料,培养料上盖报纸,发菌期间应保持报纸湿润。草菇组织在玉米秸秆培养料中菌丝浓白、粗壮,均表现出较强的活力。菌种在玉米秸秆培养料中一般5~8天便能长满培养料。以玉米桔秆为主料,棉籽壳和麦麸为辅料(玉米秸秆70%,棉籽壳20%,麦麸7%)生产草菇,接种后一般6~9天开始现蕾,12~15天即进入采收期。采收集中在前3天,其收获量大约占总产量的70%~80%。阳畦栽培草菇的产量比木箱栽培的高7
8、3%。 三、栽培香菇。主要材料:玉米秸秆粉、木屑、麸皮、多菌灵、生石灰等。方法:玉米秸秆粉60%,木屑30%,麸皮10%,准确称量后加入0.2%的多菌灵和2%的生石灰,以料水比1∶
1、1拌匀,含水量控制在55%左右。用24~55厘米的专用香菇袋装料,每袋装干料约2公斤,要快速装袋。灭菌后无菌接种,20~25℃下培菌。这种方法可以获得与纯木屑栽培香菇同样的效益,不仅减少了林木资源的消耗,保护生态环境,而且使平原地区也能栽培香菇,为玉米秸秆的利用开辟了一条新途径。 四、栽培鸡腿菇。主要材料:玉米秸秆、麸皮、过磷酸钙、石灰、尿素、细土等。方法:麸皮3%,过磷酸钙1%,石灰2%,尿素0.2%,均匀拌在一起备用。选择新鲜无霉变的玉米秸秆并晒干,视玉米秸秆的含水量加水,一般比例1∶1~
1、8。取一块塑料薄膜,宽视玉米秸秆的高度而定,长度按料多少而定。把塑料布铺在平地上,把玉米秸秆放在塑料布一头,厚度20厘米,然后把辅助料均匀地撒在玉米秸秆上,用手稍稍翻动一下,把辅助料和玉米桔秆翻匀然后再放层玉米秸秆,再撒辅助料。以此类推,堆放5~7层玉米秸秆后,将塑料布折过来,把料围住发酵。当温度达到65℃时,开始翻动玉米秸秆,上面的翻到底下,底下翻到上面,然后再盖起来,待温度再达65℃时堆料完成。其后按常规方法播种、覆土、出菇管理。 五、玉米秸秆种植双孢菇。主要材料:将玉米秸秆铡成约30厘米长的小段,堆料发酵。配方为玉米秸秆500公斤,干鸡粪100公斤,棉子饼25公斤,尿素
2、5公斤,磷肥15公斤,石灰
12、5公斤。建堆发酵。将铡好的玉米秸秆用2%的石灰水浸湿,拌匀并发酵2天,堆温达到60℃,使玉米秸秆软化,然后将浸过水的料按宽2米,高
1、8米,长度不限建堆。先铺20厘米厚玉米秸秆,再撒3-5厘米厚鸡粪,浇一次水,然后再铺一层料,撒一次鸡粪,浇一次水,注意粪要撒均匀,水要浇足。建好堆后,盖塑料膜保温保湿,注意塑料膜不要盖严,以免形成厌氧发酵。25天后当玉米秸秆由白色或浅黄色变成咖啡色,原料疏松柔软,拌有香味时即可接种。将发酵好的料,均匀地铺在预先准备好的菇床上,厚20-25厘米,压平,然后插孔进行接种,用种量1-
1、5瓶/平方米,接种后用塑料膜覆盖保温保湿,促进菌丝萌发。注意每天掀膜增氧促进菌丝生长,7天后去掉塑料膜改用纺织袋盖在料面上,即保湿又通气。覆土出菇。将准备好用来覆土的细土进行消毒处理,调好湿度(以用手握成团,松手能散即可),当菌丝长到料厚的1/4时覆第一层土厚约2厘米,待菌丝长到料厚的2/3时覆第二层土厚约
1、5厘米,覆土后要注意保持土壤水分。秋菇管理的重点是前期以降温保温为主,后期以保温保湿为主。菌丝长满后,要加大昼夜温差,但也要注意保持表面湿度促使菌丝扭结。10-15天后即可出头潮菇。出第二潮菇后,结合喷水喷"壮菇灵",可提高鲜菇产量。春菇管理的重点是保证水分,抵抗高温,防治病虫害,越冬后培养料和覆土都缺水,要采用轻喷勤喷水的方法喷0.5%石灰水,使菌丝恢复生长,促使快速出菇。