银耳出耳期管理的技术要点是什么？食用菌液体菌种接菌包快速萌发的方法?

1、银耳出耳期管理的技术要点是什么？

（1）进耳房当穴口菌丝圈直径长达10厘米左右（一般接种后9～16天）时，上床架单层排放。头2～3天，耳房内温度控制在24～25℃，使菌丝基本布满菌筒。 （2）扩口增氧揭胶布和扩口一同进行。做法是：用锋利刀片，沿穴口上胶布四个角向外0.5厘米，作弧形割破薄膜，使穴口直径达3.5～4厘米。切勿割伤菌丝体。通过扩口，培养基内菌丝获得充足氧气，菌丝体生长加快。扩口后的菌棒要侧放，使穴口朝一个方向。侧放的作用：一是使白毛团分泌的黄水流出；二是穴口上长出的白毛团不会粘连在覆盖的报纸上。 （3）盖纸喷水保湿穴口揭去胶布后，要立即用报纸覆盖于菌筒上，并喷水保湿。盖报纸的目的：一是水不会直接喷到穴口上而引起积水；二是使报纸和菌棒之间的小空间有较高空气相对湿度，不致使白毛团干枯，利于耳基分化。 （4）原基形成期的管理①温度 扩口后菌丝生活力旺盛，筒温升高，要防止高温“烧菌”。室温超过25℃，菌丝体新陈代谢加快，黄水增多，要及时把黄水去掉，否则影响出耳；高于28℃以上，会出现吐黑水现象，耳基变黑，影响出耳。低于24℃时，扩口后菌筒可紧挨一起侧放；低于20℃，要加热增温。 ②通风 每天要开门窗通风换气，保持室内空气新鲜清爽，通风时间及时机要视气温高低而定。 ③湿度 室内空气相对湿度要控制在85%～90%。晴天，每天喷水2～4次，保持覆盖报纸湿润，不滴水为度。 如此管理2～3天，穴口会长出白毛团，并分泌出黄色液体，说明菌丝已达生理成熟；再经1～2天，白毛团开始胶质化，出现黄豆大小的淡黄色银耳原基；2天后，淡黄色原基开始分化出小耳芽，即进入幼耳期。如若气温稳定在24～26℃，白天都可开门窗通气，氧气充足，耳基分化快。 此期间常出现的问题及解决办法有： ①杨梅霜病 揭去胶布后，穴口上有灰白色粉斑，有臭味，与杨梅霜相似，菇农们称之为“杨梅霜病”。出现该病后，穴内不长“白毛团”，已形成的也逐渐消融，幼耳逐渐萎缩。其发生原因主要是菌种退化或栽培时遇到高温所致。如银耳菌种转管（瓶）次数频繁或长期使用混合分离法制作菌种，容易造成菌种退化。 ②菌种块干枯 接种穴上菌种块干枯，菌丝消失，白毛团无法形成。主要原因是接种时胶布未贴紧，菌种块被风干；栽培种培养基过干；菌筒培养基含水过低：扩口后耳房湿度低。 ③分泌大量棕黑色液体 白毛团分泌大量棕黑色液体导致耳基、耳芽腐烂。主要原因是高温危害，或者菌种退化。要防止28℃以上高温；穴口斜放，让棕黑色液体流出，或用棉球吸干。 （5）生长发育期的管理约在接种后第21～22天，幼耳直径达1.5～2厘米时，原是侧放紧靠一起菌筒要改为正放，幼耳正面朝上，筒间距3～4厘米。控制适温22～24℃。高温季节，如室温超过26℃，要采取多喷水、多通风和菌筒排疏来降温。耳房内湿度要求85%～95%。喷水要根据气温和耳片长势而定，当幼耳直径达4厘米时，生长快、需水量多，可将覆盖报纸取掉，直接喷水在银耳上，喷水要适量，使耳片湿润即可。喷水的“五多五少”是：耳蕊多的多喷，耳蕊少的少喷；耳黄多喷，耳润少喷；晴天多喷，雨天少喷；气温高多喷，气温低少喷；吹干燥风天多喷，吹潮湿风天少喷。喷水要结合通风，切忌关门喷水。 此期间常出现的问题有： ①子实体干枯、不展片 空气湿度太低；经高温危害后，子实体生活力降低；室内二氧化碳含量过高，抑制生长；菌种退化。 ②烂耳原因 杂菌或细菌侵染；空气湿度太高，湿度超过95%；天花板上或上层耳架的水滴落到下层耳架的子实体上。 ③停止生长 多发生在子实体直径3～5厘米时，主要是螨虫或线虫为害所致。 （6）成耳期的管理接种后第30天前后，子实体长到直径12厘米左右，耳片由透明开始变乳白，手触有黏滑感，并弹射大量白色孢子，说明子实体进入成熟期。从进入成熟期到采收，通常需要6～8天。此期若湿度过大，会烂耳，须停止喷水，空气湿度为80%～85%即可。停水后，子实体继续生长，增重快，尚未伸展耳片继续发育，长势整齐，朵形圆正丰满，耳片肥厚。成熟期仍需加强通风，使室内空气保持清新。经停湿6～8天管理后，子实体可完全成熟（图4-33）。 图4-33 银耳的生长现场（7）采收当耳片全部展放，没有小耳蕊，耳片呈粉白色，略有收缩，并有皱褶，变软下垂，弹性变差；耳基变黄；子实体形似牡丹或菊花，直径12～16厘米，鲜重150～250克；菌筒薄膜有很多皱纹，菌筒变轻时及时采收。采收时，用手抓住耳基，往上拔采。采下后，用小刀刮去蒂头带有培养基的黑色部分，若有烂耳要刮去腐烂的部分。摘取和刮蒂时，动作要轻，切勿损坏朵形。若有菌糠黏附在耳片上，应放在清水池中漂洗清洁，再排放在竹筛上将附着的水分沥干。沥干水分后，及时烘干加工（图4-34）、包装（图4-35）。 图4-34 银耳的烘干加工图4-35 银耳包装。

2、食用菌液体菌种接菌包快速萌发的方法?

食用菌是指子实体硕大、可供食用的蕈菌(大型真菌)，通称为蘑菇。中国已知的食用菌有350多种，其中多属担子菌亚门，常见的有:香菇、草菇、蘑菇、木耳、银耳、猴头、竹荪、松口蘑(松茸)、口蘑、红菇、灵芝、虫草、松露、百灵和牛肝菌等;少数属于子囊菌亚门，其中有:羊肚菌、马鞍菌、块菌等。上述真菌分别生长在不同的地区、不同的生态环境中。

3、银耳菌种怎样保藏？要注意哪些？

银耳菌种保藏方法有以下几种：（1）低温传代保藏挑选健壮的一级试管种，将棉塞齐管剪平，再用石蜡封口，以减少培养基失水，然后直接置于冰箱中1～4℃的温度下保藏。此法保藏期较短，耳友菌丝每隔3～4个月转管一次，而银耳纯白菌丝在5个月之内应使用完毕。低温斜面保藏时，一般要采用营养丰富的天然培养基。最好在培养成分上加入少许0.2%磷酸二氢钾、磷酸氢二钾做缓冲剂，以中和菌种保藏过程积累的有机酸。（2）液体石蜡保藏此法适用于耳友菌丝的保藏，保藏期2～4年。其方法比较简便，只在斜面菌种的试管内注入经灭菌的石蜡油，注入量以高于斜面1厘米为宜，使菌丝体与空气隔绝，降低其新陈代谢。再用无菌的橡皮塞好，石蜡封口，直立存放干燥处或冰箱中保藏。最好1年移植1次，使用时不必倒去石蜡，只要用接种针从斜面上勾取一小块菌丝即可，其余继续保藏。操作时注意：液体石蜡在火焰灭菌时易飞溅，刚从石蜡菌种中挑出移接的菌丝块沾有石蜡油，故生长微弱，必须再转接一次才能恢复正常。液体石蜡保藏见图22。图22 液体石蜡保藏法1.橡皮塞 2.标签 3.液体石蜡 4.培养基（3）滤纸保藏此法适合银耳芽孢的保藏，保藏期限4年以上。其方法是：经孢子弹射提纯的芽孢，预先培养在斜面培养基上，菌龄不超过1个月。操作时，先将滤纸剪成40毫米×40毫米的方块，中央用红色铅笔做好记号，卷成小筒，装入试管内，棉塞封口；再经高压灭菌后，置于40℃烘箱中烘干；然后在无菌室内用接种环挑取一环芽孢，涂在滤纸记号处，放回试管内，置于硅胶干燥器内吸潮7～10天；最后放入装有5～10克硅胶的大试管中，用无菌橡皮塞塞好，用蜡封口，置低温下保藏。使用时在无菌条件下取出滤纸，用接种环沾上无菌水，在滤纸有标记处刮取银耳芽孢，移入新制的无菌斜面培养基上。在适温下培养，芽孢开始繁殖形成酵母状菌落，经镜检无杂菌，即可用于生产。（4）真空冷冻干燥此法是采用真空、干燥和低温3种手段来保藏菌种，保藏期长达10年之久，仍不降低其原有种性。基本方法是：将保藏的银耳芽孢悬液，装在特别的安瓿管内，然后骤然冰冻，并立即抽成真空，使培养物以固体形态升华脱水，形成完全干燥的固体菌块，在真空条件下熔封后，低温保藏。此法限于保藏银耳芽孢悬液，而对银耳菌丝体和耳友菌丝体的保藏不适合。为保持银耳菌种优良性状，在生产中最好把经常使用的斜面低温传代、冰箱保藏法与真空冷冻干燥保藏法、液体石蜡保藏法等结合使用，以减少传代次数。原则是，原始菌种第一次传代时，可以多传一些斜面，部分用于第一次生产母种，部分留作第二次、第三次生产母种，部分用液体石蜡法或真空冷冻干燥法保藏。这样能使每批生产用的菌种都能保持或接近原始菌种的优良性状。菌种保藏注意以下几点：（1）适宜的保藏培养基保藏母种应选择适宜的保藏培养基，其配方一般要求含有机氮多，含糖量不超过2%。这样既能满足菌丝生长的需要，又能防止酸性增大，以保持菌丝旺盛的活力。（2）适宜的保藏温度必须根据种性特性，选择适宜的保藏温度。存放菌种的场所，必须通风、干燥，并要求遮荫，避免强光直射。存放于电冰箱中保藏的菌种，箱内温度不应过高或过低。温度过低，斜面培养基会结冰脱水，菌种容易衰老或死亡；过高，则达不到保藏之目的。（3）封好菌种试管口菌种的试管口用塑料薄膜包扎，或用石蜡封存，防止培养基因干涸或棉塞受潮而引起杂菌污染。（4）使用前应活化保藏的银耳菌种在使用前，需先置于23～26℃适温下让其活化，然后转管，更新选育。

4、怎样鉴别银耳菌种质量的优劣？

鉴别银耳菌种优劣的感观指标如下：（1）斜面琼脂试管种①菌龄。在适温下接种后培养13～18天，其菌丝生长旺盛。②白毛团。饱满，圆正，色泽洁白，气生菌丝直立或斜立，平贴培养基上，分泌无色或含黄色水珠；15天后白毛团分化成碎米状原基和耳芽。③耳友菌。呈黑褐色，布满培养基，气生菌丝灰白色、羽毛状爬向管壁，走势旺盛。符合上述情况者为优质一级种。如果白毛团气生菌丝呈萎黄、倒伏状，不拌有水球，或原基干枯萎缩；耳友菌的气生菌丝在管壁收缩，培养基与管壁已脱离，说明菌种老化，生活力差。（2）木屑一级种在实际生产中，银耳菌种常采用菌瓶木屑一级种。它是由斜面一级种接入或通过基内分离混合而成。优质菌瓶一级种感官标准如下：①菌龄。混合菌丝体在适温条件下培养30天左右。②菌丝体。黑褐色，走势整齐，满瓶，伴有深绿色或黄褐色的分泌物，逐层伸展呈花纹状；菌丝未出现间断、拮抗线、杂斑。③子实体。位于培养基表面中部，比拇指大，晶莹洁白、耳片厚密，舒展有力，朵状美观、无污染物。符合上述情况者为优质木屑一级种。如若培养基与瓶壁明显脱离，基质松散，菌丝伸展有间断、有杂斑、拮抗线，耳基变淡红色或出现大量褐色液体，或子实体萎黄、畸形、耳形差，有杂菌污染、霉烂等均属不合格，应淘汰。（3）二级种银耳优质二级种感官指标如下：①菌龄。接种后在适温条件下培养25～30天为适龄；由木屑一级种散接的，生长较快，15～20天为适龄。菌龄太短，生理成熟度不够；菌龄太长，影响扩接栽培种后的出耳时间。②菌丝体。与瓶壁紧贴，菌丝状黑褐色，走势健壮有力；搬动后也出现墨绿色和黄褐色分泌物；无出现间断、杂斑和拮抗线。③原基。于培养基表面，出现胶质化碎米状耳芽和小耳片，伴有酱油色或棕红色水珠。符合上述情况者为优质二级种。如若培养基干缩，菌丝有衰退现象，走势不齐，有间断、斑点、杂菌、拮抗线，在原基上布有一层白色棉絮状的菌膜，原基萎烂、收缩、霉烂等列为不合格，应淘汰。（4）三级种栽培种感观标准为：①菌龄。7～12天，最佳菌龄8～10天。菌龄太短萌发力弱，菌龄太长抗逆力差，这是银耳栽培种的一个独有特征。②耳友菌。灰白色，分泌黑色素，瓶壁上现浅黑色花纹，长势健壮有力，分布均匀整齐，伸入培养基深层4～5厘米；无出现节斑，间断，无杂菌污染。③白毛团。培养基表面布满许多白毛团，色泽洁白，颗粒饱满；气生菌丝短、满团，健壮；伴有少量无色或深黄色水珠。符合上述情况者为优质三级种。若耳友菌丝稀薄纤弱，长势不齐；培养基出现绿、红、黑、黄等颜色斑点，证实为杂菌污染。若表面出现灰白色小粒团，与白毛团比较，有明显差异，证实为“杨梅霉杆菌”混生，此类属于劣种，应淘汰处理。菌种质量除感观检测外，还有栽培各项经济指标，如接种后成活率，出耳快慢，商品性状，干燥率等。所以菌种的真正优劣还是以栽培出耳的结果与成效为最终判断指标。

5、银耳菌种怎样保藏？要注意哪些？

银耳菌种保藏方法有以下几种：（1）低温传代保藏挑选健壮的一级试管种，将棉塞齐管剪平，再用石蜡封口，以减少培养基失水，然后直接置于冰箱中1～4℃的温度下保藏。此法保藏期较短，耳友菌丝每隔3～4个月转管一次，而银耳纯白菌丝在5个月之内应使用完毕。低温斜面保藏时，一般要采用营养丰富的天然培养基。最好在培养成分上加入少许0.2%磷酸二氢钾、磷酸氢二钾做缓冲剂，以中和菌种保藏过程积累的有机酸。（2）液体石蜡保藏此法适用于耳友菌丝的保藏，保藏期2～4年。其方法比较简便，只在斜面菌种的试管内注入经灭菌的石蜡油，注入量以高于斜面1厘米为宜，使菌丝体与空气隔绝，降低其新陈代谢。再用无菌的橡皮塞好，石蜡封口，直立存放干燥处或冰箱中保藏。最好1年移植1次，使用时不必倒去石蜡，只要用接种针从斜面上勾取一小块菌丝即可，其余继续保藏。操作时注意：液体石蜡在火焰灭菌时易飞溅，刚从石蜡菌种中挑出移接的菌丝块沾有石蜡油，故生长微弱，必须再转接一次才能恢复正常。液体石蜡保藏见图22。图22 液体石蜡保藏法1.橡皮塞 2.标签 3.液体石蜡 4.培养基（3）滤纸保藏此法适合银耳芽孢的保藏，保藏期限4年以上。其方法是：经孢子弹射提纯的芽孢，预先培养在斜面培养基上，菌龄不超过1个月。操作时，先将滤纸剪成40毫米×40毫米的方块，中央用红色铅笔做好记号，卷成小筒，装入试管内，棉塞封口；再经高压灭菌后，置于40℃烘箱中烘干；然后在无菌室内用接种环挑取一环芽孢，涂在滤纸记号处，放回试管内，置于硅胶干燥器内吸潮7～10天；最后放入装有5～10克硅胶的大试管中，用无菌橡皮塞塞好，用蜡封口，置低温下保藏。使用时在无菌条件下取出滤纸，用接种环沾上无菌水，在滤纸有标记处刮取银耳芽孢，移入新制的无菌斜面培养基上。在适温下培养，芽孢开始繁殖形成酵母状菌落，经镜检无杂菌，即可用于生产。（4）真空冷冻干燥此法是采用真空、干燥和低温3种手段来保藏菌种，保藏期长达10年之久，仍不降低其原有种性。基本方法是：将保藏的银耳芽孢悬液，装在特别的安瓿管内，然后骤然冰冻，并立即抽成真空，使培养物以固体形态升华脱水，形成完全干燥的固体菌块，在真空条件下熔封后，低温保藏。此法限于保藏银耳芽孢悬液，而对银耳菌丝体和耳友菌丝体的保藏不适合。为保持银耳菌种优良性状，在生产中最好把经常使用的斜面低温传代、冰箱保藏法与真空冷冻干燥保藏法、液体石蜡保藏法等结合使用，以减少传代次数。原则是，原始菌种第一次传代时，可以多传一些斜面，部分用于第一次生产母种，部分留作第二次、第三次生产母种，部分用液体石蜡法或真空冷冻干燥法保藏。这样能使每批生产用的菌种都能保持或接近原始菌种的优良性状。菌种保藏注意以下几点：（1）适宜的保藏培养基保藏母种应选择适宜的保藏培养基，其配方一般要求含有机氮多，含糖量不超过2%。这样既能满足菌丝生长的需要，又能防止酸性增大，以保持菌丝旺盛的活力。（2）适宜的保藏温度必须根据种性特性，选择适宜的保藏温度。存放菌种的场所，必须通风、干燥，并要求遮荫，避免强光直射。存放于电冰箱中保藏的菌种，箱内温度不应过高或过低。温度过低，斜面培养基会结冰脱水，菌种容易衰老或死亡；过高，则达不到保藏之目的。（3）封好菌种试管口菌种的试管口用塑料薄膜包扎，或用石蜡封存，防止培养基因干涸或棉塞受潮而引起杂菌污染。（4）使用前应活化保藏的银耳菌种在使用前，需先置于23～26℃适温下让其活化，然后转管，更新选育。

6、常用的菌种保藏方法有哪些？

菌种的优劣是食用菌生产成败的关键。菌种是国家重要的生物资源，也是微生物工厂首要的生产资料。由于微生物繁殖快、易变异，因此微生物菌种特别需要妥善保藏。世界各国对微生物菌种都很重视。中国科学院微生物研究所专门设立了菌种的保藏机构，为各生产单位收藏和供应各种优良菌种。当然就具体的生产单位而言，大量的生产用菌种还得靠自己来生产和保藏。菌种保藏的目的：是使优良菌种经过较长时间后，仍能保持菌种的优良性状、生活能力及纯度，降低菌种的衰亡速度，确保菌种的纯一，防止杂菌污染及绝种。保藏菌种的方法：人们在长期的生产实践中，积累了不少保藏菌种的经验，常用的保藏方法有：斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、砂土管保藏法、滤纸片保藏法、谷粒保藏法等。常用保藏菌种的方法有以下几种：（1）斜面低温保藏法这是最简单最普通的保藏方法。首先将菌种在适宜的斜面培养基（一般PDA）上培养成熟后，选择菌丝生长粗壮，边缘保存。一般保存温度4～6℃，除草菇和银耳菌种外（10～15℃），此方法对其他食用菌都适宜，一般菌种可保藏2～4个月，所以需定时移接。此法保藏虽然方便，但是保藏时间短，需经常转管，也很容易发生衰退变异现象。因此，不能用作长期保藏，最好与其他方法结合起来保藏。另外，为了减少保藏期间培养基水分蒸发，琼脂最好加到2.5%。为防止菌种在保藏过程中产酸分的积累，应加入0.2%的磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等缓冲盐类，同时，培养成熟后，最好将棉塞管口外剪平，并用矿蜡封或换以无菌木塞，这样做也可以减少培养基水分的散失，延长保存时间。在农村如果没有冰箱，可采用土法保藏。即把保藏用的斜面菌种换上无菌橡皮塞，并用矿烛蜡封后密闭的广口瓶中，悬入井底保藏。（2）贮藏室保藏法原种和栽培种一般只在贮藏室短期保藏，贮藏室温度0～10℃为好。室内应清洁、干燥、无光，应经常检查温度和湿度，以降低其生活力，减少变异退化，防止杂菌污染，避免过早出菇。温度越高，保存的时间越短。